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采用Novagen《pET系统手册》提供的方法,进行细菌渗透压休克和超声裂解,研究融合蛋白在周质、细胞质和包涵体中的分布。此外,可以通过使用温和的洗涤剂TritonX-100 清洗来去除膜碎片和膜蛋白。精华5:因为我做的bata-actin和P38的分子量差不多,所以我需要弄清楚是否可以完全消除抗体。

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超声波裂解细菌渗透压休克细菌沉淀添加培养物体积的1/10 20 mM Tris-HCl (pH 7.5, 0C) 重悬,冰浴,超声波裂解,20% 工作选择,脉冲破碎1 分钟,然后13000 r/min离心5 min,上清液和菌沉淀20保存。该系统具有灵活的角色模型,因此它反映了组织的结构和权限- 源网站php。

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去垢剂如Triton具有蛋白水解酶活性,在包涵体溶解和复性过程中可导致重组蛋白的降解。

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加入V1体积的渗透压休克溶液2重悬,冰浴振荡10 min,10000 r/min离心0.5 min,保存上清和菌沉淀。要在播放正常任务及其通知的执行器之后执行任务,请使用post_tasks 部分。 TritionX100、SDS等洗涤剂难以去除,一般不允许在制药行业使用。

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